AimPlex™ 多重檢測技術怎么運行的？

AimPlex™ 多重檢測技術利用按大小和不同熒光強度水平區分的多個珠群。 AimPlex 技術具有 4 和 5 微米兩種尺寸的珠子，每種珠子尺寸（4S 和 5S）有 12 個熒光強度級別，只需15 µL 樣品即可在一次反應中同時測量多達 24 種分析物。使用配備藍色 488nm 和紅色 635nm 激光器或僅配備 488nm 激光器的標準流式細胞儀測定反應中的珠群。珠分類染料的最大發射波長為 700 nm。
 
與夾心 ELISA 的原理類似，每個珠群與特定的捕獲抗體結合，捕獲樣品中的目標蛋白質，例如細胞因子。通過針對蛋白質二級表位的生物素化抗體檢測捕獲的分析物的量，然后進行鏈霉親和素-R-藻紅蛋白處理。在配備有 488nm 激光器的流式細胞儀上對珠子上的 R-藻紅蛋白的熒光強度進行定量，并使用 PE 通道檢測器進行測量。通過將熒光信號與由已知濃度的蛋白質分析物的系列稀釋產生的標準曲線的信號進行比較，可以獲得樣品中感興趣的蛋白質的濃度。
 
測定程序包括 60 分鐘抗原和捕獲抗體綴合珠孵育步驟、30 分鐘生物素化檢測孵育步驟和 20 分鐘鏈霉親和素-PE 孵育步驟。每次孵育步驟后通過流通式過濾器底部微孔板清洗珠子可提供最高的信噪比。