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詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | IQ431 |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 一個月 |
ImmuQuest抗體：C4d補體片段單克隆抗體
| 主要描述： | C4d 補體 [LP69] |
| 目標抗原： | C4d 補體 |
| 目錄號： | 智商431 |
| 數量： | 0.1毫克 |
| 專注： | 1毫克/毫升 |
| 克隆： | LP69 |
| 主持人： | 老鼠 |
| 同種型： | 免疫球蛋白G1 |
| 免疫原： | 從正常人血漿中補充 C4d |
| 物種反應性： | 人類 |
| 純化： | 蛋白G親和層析 |
| 格式： | 含有 PBS + 10mM 純化抗體 |
| 應用： | IHC-P、IHC-Fr |
| 稀釋： | 最佳抗體稀釋度應通過滴定確定，但 IHC-P 的指導原則是使用 1:25-1:50 |
| 也稱為： | DADB-112B14.11、C4B1、C4B12、C4B2、C4B3、C4B5、C4F、CH、CO4、CPAMD3、FLJ60561、MGC164979 |
| 已發布 ID： | 34231390、27146825、23443736 |
| Entrez 基因 ID： | 100293534、100507685、720、721 |
| SwissProt ID： | p0c0l4, p0c0l5 |
| Omim ID(s):： | 120810, 120820 |
從 Tcunit 收集細胞，并使用吸力從培養皿中取出培養基。
用 1x PBS 清洗并去除。
將細胞在預溫 (37°C) 多聚甲醛中在定軌搖床上室溫孵育 12 分鐘。
除去PFA并在1x PBS中的0.5% Triton X-100中在室溫下孵育5分鐘。
準備封閉試劑，這也是抗體稀釋液。
在室溫下用 1x PBS 洗滌細胞 2x，在軌道搖床上洗滌 4 分鐘/洗滌。
用 1% NCS 和 1x PBS 在室溫下封閉 30 分鐘。
準備一抗（50μl/蓋玻片）和濕染色室。
在室溫下用 lx PBS 清洗細胞 2x，并短暫風干。
在染色室中、黑暗中、室溫下與一抗一起孵育 1 小時。在此期間準備二抗。
用 1x PBS 清洗細胞 5 次（更換燒杯 5 次/每個燒杯計數 5 次）
在染色室中、黑暗中、室溫下與二抗一起孵育 1 小時。
用 1x PBS 清洗細胞 5x。
坐于大皮。
溶液（染色當天新鮮配制）。
* 1x 磷酸鹽緩沖鹽水。
* 封閉試劑：1% NCS，溶于 1x PBS（使用新鮮的 10x PBS）。
* 固定液：3.5% 多聚甲醛。
1.75g PFA 溶于 20 ml d.H2O 加 5 滴 1M NaOH 中。在 50-60°C 的熱板上攪拌直至溶解。添加 4 滴 HCl 并檢查 pH 指示條。 PH值應為7.4。用 d.H2O 補足體積至 25ml，并添加 25ml 2xPBS。添加到蓋玻片之前檢查 pH 值。
從 TCunit 收集細胞，并使用吸力從培養皿中取出培養基。
用 1x PBS 清洗并去除。
用冷甲醇:丙酮 1:1 在冰上固定細胞 10 分鐘。
準備封閉劑，這也是抗體的稀釋劑。
除去固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3x，在定軌搖床上洗滌4分鐘/洗滌。
在 RT 下用 1% NCS 和 1x PBS 封閉 30 分鐘。
準備一抗（50μl/蓋玻片）和濕染色室。
在 RT 下用 1 x PBS 清洗細胞 2x，并風干約 7 分鐘。
在染色室中在黑暗中與一抗一起在室溫下孵育 1 小時。在此期間準備二抗。
用 1x PBS 清洗細胞 5 次（更換燒杯 5 次/每個燒杯計數 5 次）
在染色室中在黑暗中與二抗一起在室溫下孵育 1 小時。
用 1x PBS 清洗細胞 5x。
坐于大皮。
溶液（染色當天新鮮配制）
* 1x 磷酸鹽緩沖鹽水。
* 封閉試劑：1% NCS 溶于 1x PBS（使用新鮮的 10x PBS）。
* 固定液：甲醇:丙酮 1:1 冰冷。
將凝膠轉移到 PDVF 或硝酸纖維素膜上
將膜放入塑料托盤中，并在封閉緩沖液中攪拌一小時
在洗滌緩沖液中沖洗
在洗滌緩沖液加一抗中孵育一小時
用洗滌緩沖液洗滌 6 X 5 分鐘
在加二抗的洗滌緩沖液中孵育一小時
用洗滌緩沖液洗滌 6X 5 分鐘
檢測（例如 ECL、Amersham 根據制造商說明）
PBS + 0.1% 吐溫 20
洗滌緩沖液+5%奶粉
所用抗體的濃度取決于每種抗體、抗原的量和所用的檢測方法。一般來說，稀釋度在幾百倍到幾千倍稀釋范圍內，但通常必須憑經驗確定。
ImmuQuest公司提供一系列*和新穎的抗體，以盡可能高的質量制造，處于科學研究的前沿。 我們所做的每一件事都是根據研究人員的需要來開發的。只要有可能，我們的抗體就會在WB、ELISA、IHC(冰凍切片和石蠟切片)和ICC/IF等應用程序中進行測試，并在我們的數據表中公布。許多都可以以定制的格式提供。Immuquest的大多數抗體都是在我們自己的嚴格控制下制造的。這意味著你將永遠知道你點的東西是高質量的。
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