avidity：BirA 生物素蛋白連接酶

BirA 生物素蛋白連接酶 (EC 6.3.4.15) 激活生物素形成生物素 5'-腺苷酸，并將生物素轉(zhuǎn)移至生物素接受蛋白（例如 AviTag™ 肽）。它還充當(dāng)生物素操縱子阻遏物。該蛋白質(zhì)由 birA 基因編碼。

請(qǐng)注意：我們強(qiáng)烈建議使用 AviTag™ 氨基酸序列，而不是其他生物素化肽序列。 BirA 酶對(duì) AviTag™ 序列進(jìn)行生物素化，其反應(yīng)速率是天然底物 (BCCP) 的 2 倍，比使用的其他肽序列高一個(gè)數(shù)量級(jí)或更高。與其他肽生物素化序列相比，AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育時(shí)間，從而最大限度地減少與蛋白酶和蛋白質(zhì)不穩(wěn)定性相關(guān)的輔助問題。

產(chǎn)品信息

套件隨附以下內(nèi)容：

• 兩 (2) 瓶 20uL，每瓶 1mg/mL BirA 生物素蛋白連接酶（總共 40ug）

• 兩 (2) 瓶每瓶 1.5mL BiomixA（0.5M 二甘氨酸緩沖溶液，pH 8.3）

• 兩 (2) 瓶每瓶 1.5mL BiomixB（100mM ATP、100mM Mg(OAc)2、500uM d-生物素）

• 兩 (2) 瓶 1.5mL，每瓶額外 BIO-200（500uM d-生物素）

BirA 生物素蛋白連接酶 (EC 6.3.4.15) 通過 ATP 中間體（生物素 5'-腺苷酸）以高效和靶向的方式將 d-生物素共價(jià)添加到生物素受體肽/蛋白上。酶促生物素化蛋白質(zhì)的下游應(yīng)用多種多樣、重要且強(qiáng)大。生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用通常用于親和層析或表面或基質(zhì)上的蛋白質(zhì)固定。通過抗生物素抗體或親和素/鏈霉親和素-報(bào)告酶綴合物（-HRP、-堿性磷酸酶）或熒光探針進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測(cè)成為可能。生物素化 MHC 分子的多聚體形式是免疫生物學(xué)中常用的工具。

當(dāng)與我們的 AviTag™ 生物素受體肽氨基酸序列結(jié)合使用時(shí)，生物素化發(fā)生率是天然大腸桿菌 BCCP 底物的兩倍，比其他生物素化肽序列高出一個(gè)數(shù)量級(jí)或更多。因此，與其他可用序列相比，AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育時(shí)間來完成生物素化。如果蛋白質(zhì)不穩(wěn)定性或蛋白酶活性是一個(gè)問題，這可能對(duì)下游的成功很重要。

我們的 BirA 酶是大腸桿菌野生型，由 birA 基因編碼，并通過傳統(tǒng)方法純化至 99% 以上的純度。該酶的其他名稱包括：生物素連接酶；生物素操縱子阻遏蛋白；比爾A；生物素全酶合成酶；生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶；生物素-[乙酰輔酶A-羧化酶]連接酶；生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶；乙酰輔酶A全羧化酶合成酶；乙酰輔酶A全羧化酶合成酶；生物素:脫輔基羧化酶連接酶;生物素全酶合成酶。

avidity：BirA 生物素蛋白連接酶