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            當前位置:首頁 > 產品中心 > 實驗試劑 > 試劑盒 > K61009MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit

            MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit

            簡要描述:MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit
            MagVigen唾液DNA提取試劑盒

            • 產品型號:K61009
            • 廠商性質:代理商
            • 更新時間:2024-08-21
            • 訪  問  量:280

            詳細介紹

            品牌其他品牌貨號K61009
            供貨周期現貨應用領域醫療衛生,化工,生物產業,制藥

            MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit


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            產品內容

            • MagVigen唾液DNA捕獲納米顆粒
            • 唾液溶解緩沖液
            • 蛋白酶K
            • 蛋白酶K緩沖液
            • 清洗緩沖液1原液
            • 洗脫緩沖液

            所需材料

            • 異丙醇
            • 乙醇
            • 十二烷基硫酸鈉,16%
            • 磁性架(NVIGEN目錄號A20006)

            注意:
            MagVigen唾液DNA捕獲試劑盒(K61009)可以從唾液樣本中捕獲DNA (>30bp)。

            協議

            1. 準備唾液樣本:如果使用冷凍唾液,在室溫下融化。將唾液以10000x離心10分鐘,以去除任何沉淀。

            2. 制備裂解緩沖液:如果有固體,在60℃加熱幾分鐘,形成澄清溶液。

            3. 制備蛋白酶溶液:向蛋白酶K小瓶中加入蛋白酶K緩沖液。渦旋混合均勻。儲存于-20°c

            4. 準備清洗緩沖液1:根據表1計算所需的量。向每550 μl清洗緩沖液1儲備液中添加450 μl異丙醇。每次都要做緩沖。

            5. 檢查表1中的試劑使用情況。

            6. 將蛋白酶K溶液加入樣品管底部,將320 μl唾液樣品加入管中,將80μl 1x PBS加入管中。渦旋5秒鐘,以充分混合,短暫旋轉。

            7. 向試管中加入16% SDS。渦旋5秒鐘,以充分混合,短暫旋轉。

            8. 向試管中加入唾液溶解緩沖液。渦旋1分鐘以充分混合。短暫降速。在60°C的水浴中孵育30分鐘。

            9. 添加MagVigen唾液DNA捕獲納米顆粒。輕輕搖動小瓶使其分散。然后加入異丙醇,渦旋混合均勻,短暫減速,并保持低速至中速渦旋45分鐘。

            10. 將反應管放在磁性架上,沉淀珠子,直到溶液澄清(大約10分鐘,取決于磁體的強度和樣品體積)。

            11. 慢慢去除上層清液。注意不要拿走任何珠子,盡可能多地取出溶液。輕敲固體表面上的磁性架,使殘留溶液沉淀到試管底部,去除所有上清液。

            12. 從磁鐵上取下試管,加入清洗緩沖液1。通過移液或渦旋混合。短暫降速。在磁性架上沉淀珠子(約10分鐘),去除上清液。在表面上輕敲磁架。除去所有上清液。


              注意:

              不需要*全分散珠子。用移液器吸頭盡可能分散就可以了。

            13. 使用80%的乙醇清洗珠子沉淀。不需要*全分散珠粒。稍微向前和向后傾斜磁性架,使樣本管留在磁性架上。然后短暫旋轉,使蓋子中沒有溶液殘留。在磁性架上沉淀珠子(約3分鐘),并去除所有上清液。輕敲固體表面上的磁性架,將上清液殘渣沉淀到試管底部。除去所有上清液。

            14. 使用80%乙醇再次清洗珠子沉淀。沉淀珠子(~ 2-3分鐘)并去除所有上清液。

            15. 將試管留在磁性架上,風干沉淀以蒸發所有乙醇。這需要2-3分鐘。

            16. 向珠子中加入所需量的洗脫緩沖液,上下吸取,直到所有沉淀*全重新分散。將珠子分散在洗脫緩沖液中3分鐘。

            17. 短暫降速。然后將試管放在磁性支架上5分鐘。

            18. 在不干擾磁珠沉淀的情況下收集上清液。上清液含有提取的DNA。移出DNA溶液進行下游實驗時,將試管放在磁鐵旁邊。如果不立即使用,提取的DNA溶液可以儲存在-20℃下。

            表1。每個步驟中使用的試劑體積。

            試劑微升
            蛋白酶K6
            唾液320
            1X PBS80
            SDS (16%)25
            裂解緩沖液190
            磁珠28
            異丙醇480
            清洗緩沖液1160
            清洗緩沖液2 / 3 (80%乙醇)160
            洗脫示例40
            總體積1.2毫升


            MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit







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